冻存细胞负80放多久细胞冻存在-80度保存多久？

冻存细胞负80放多久

细胞冻存是一种保存细胞的方法，可以将活细胞捕捉在某个时间点处，以便在今后的实验中使用。冻存细胞时，一般会将细胞混合在含有DMSO（二甲基亚砜）的冻存液中。该液体含有保护细胞的成分，以防止细胞受到冰冻损伤。

为了冻存细胞，您需要做以下几个步骤：

1）将培养皿中的细胞取出，在离心机中进行离心。去除培养液，并用PBS（磷酸盐缓冲液）洗涤细胞。

2）离心细胞，并用PBS洗涤一次。

3）用含DMSO和FBS（胎牛血清）的冻存液混合细胞。

4）将混合好的细胞分别放入冻存管中，并放入液氮中以便在样品中长期保存。

一旦成功冻存细胞，您可以将冻存管长期保存在液氮罐中。在零下80摄氏度的温度下，细胞可以无限期地保持活性。但是，在某些情况下，您可能需要从液氮罐中取出细胞，并将其解冻以便在实验中使用。在这种情况下，如果您遵循正确的步骤，那么您可以成功地回收细胞。

一般来说，细胞可以在-80℃下保存数年之久。但是，备份和验证是确保细胞在这个时期内保存良好的重要步骤。如果细胞由于不正确的保存方式而受到冰冻损伤，那么您可能需要重新冻存，或者从头培养细胞线。因此，细胞质保存时需要非常小心。

正确的解冻过程可以恢复细胞的健康并最小化细胞损伤。下面是解冻细胞的步骤：

1）从液氮罐中取出冻存管，并放在溶解缓冲液中。这可以在37°C的水浴中完成。

2）轻轻转动管子，以快速融化（10-15秒） Thawing the cells by gently rotating the tube using your fingers until all the ice has melted. 在此过程中请小心，避免过度转动，以免细胞受到不必要的压力。

3）离心细胞，去除缓冲液，并再次用培养基洗涤。

4）在无菌条件下，将细胞移植到新的培养皿或板中。

请注意，解冻的过程可能会使细胞受到压力，并导致其生长率下降。为了保护您的细胞，请在解冻后仔细监测和观察，以确保它们能够迅速恢复并重新开始生长。

冻存细胞是实验室中常用的技术之一。在正确冻存和解冻过程中对细胞进行细心照顾可以确保它们的长期存活，并维持健康状态。